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      透射及掃描電鏡的操作方法

       更新時間:2016-07-11 點擊量:5742
        一、實驗目的:
      1、了解透射電鏡、掃描電鏡各部件的名稱、結構及性能;
      2、了解透射及掃描電鏡的基本操作程序;
      3、了解電鏡樣品制備的配套設備。
      二、實驗儀器及用品:
      透射電鏡;掃描電鏡;小白鼠肝臟超薄切片;酵母菌或乳酸桿菌的負染樣品;噴好金膜的葉片及花粉樣品
      三、方法步驟:
      (一)透射電鏡操作規(guī)程:
      1、本儀器的操作者必須熟悉儀器的全部操作規(guī)程,通過操作考試后才能正式上機操作。
      2、操作程序
      1)開機準備
      (1) 合上總電源閘刀,開啟電子交流穩(wěn)壓器,電壓指示應為220V。開啟循環(huán)水,溫度指示應為15-20℃。
      (2) 開啟主機真空開關。
      (3) 約20分鐘后,待高真空指示燈及照相室指示燈亮。
      2)工作程序
      (1)開啟主機電源開關,待熒光屏顯示操作數(shù)據(jù)后再進行下一步。
      (2)逐級加高壓致所需電壓,每加一級高壓,必須等高壓表中指示針停止擺動才能加下一級。如指示針移出量程,必須從zui低移級加起。
      (4) 根據(jù)說明書要求進行合軸操作,使儀器處于*操作狀態(tài)。
      (4)根據(jù)說明書的操作要求進行觀察、換樣和拍照。
      (5)作好實驗記錄及儀器使用記錄。
      3)關機程序
      (1)關燈絲電流。
      (2)關高壓。
      (3)關主機電源開關。
      (4)關真空開關。
      (5) 20分鐘后,關循環(huán)水和電子交流穩(wěn)壓器開關。
      (6) 關閉總電源。
      (二)掃描電鏡操作規(guī)程:
      1、本儀器的操作者必須熟悉儀器的全部操作規(guī)程,通過操作考試后才能正式上機操作。
      2、操作程序
      1)開機準備
      (1)合上總電源閘刀,開啟電子交流穩(wěn)壓器,電壓指示應為220V。開啟冷卻循環(huán)水裝置電源開關。
      (2)開啟試樣室真空開關(VACUUM POWER),開啟試樣室準備狀態(tài)開頭(STAND BY)。
      (3)開啟控制柜電源開關(POWER).
      (4)約20分鐘后,往試樣室液氮冷井中加入液氮。
      2)工作程序
      (1)開啟試樣室進氣閥控制開關(CHAMB VENT),將試樣放入試樣室后將試樣室進氣閥控制開關(CHAMB VENT)關閉抽真空。
      (2)開啟鏡筒真空隔閥。
      (3)加高壓(ACCELERATION POTENTIAL)至25KV.
      (4)加燈絲電流(FILAMENT)至7.5-8.
      (5)調節(jié)顯示器對比度(CONTRAST)、亮度(BRIGHTNESS)至適當位置.
      (6)將圖象選區(qū)開關撥至全屏(FULL).
      (7)調節(jié)聚焦旋鈕(MEDIUM)和(FINE)至圖象清晰。
      (8)選擇適當?shù)膾呙杷俾?SCAN RATE)觀察圖象。
      (9)根據(jù)說明書的操作要求進行觀察和拍照。
      (10)作好實驗記錄及儀器使用記錄。
      3)關機程序
      (1)關燈絲電流(FILAMENT)。
      (2)關高壓(ACCELERATION POTENTIAL)。
      (3)反時針調節(jié)顯示器對比度(CONTRAST)、亮度(BRIGHTNESS)到底.
      (4)關閉鏡筒真空隔閥。
      (5)關主機電源開關。
      (6)關真空開關。
      (7)20分鐘后,關循環(huán)水和電子交流穩(wěn)壓器開關。
      (8)關閉總電源。
      四、觀察結果:
      1、小白鼠肝臟超薄切片:一般可見細胞膜、核膜、內質網、線粒體、肌纖維等結構。
      2、酵母菌或乳酸桿菌的負染樣品:由于重金屬鹽在樣品周圍的堆積而使樣品顯示負的反差,從而襯托出樣品的形態(tài)和大小。酵母菌近球型,有時可見出芽生殖;乳酸桿菌為桿狀。
      3、葉片在掃描電鏡下一般可見上表皮有各種紋飾,下表皮可見氣孔器形態(tài)
      4、花粉在掃描電鏡下一般可見表面的萌發(fā)溝和紋飾。
      觀察過程中尋找典型部位進行拍照。

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